軟件：OriginPro9.1
素材：PAM熒(ying)光儀導出的(de)PAR和ETR數據。
操作步(bu)驟
1，正確安(an)裝Origin軟件，打開軟件
2，打開正(zheng)確操作PAM測量得(de)到的快速光曲線數據文件
3，將PAR和(he)ETR的數據復制到Origin軟件，并編輯橫(heng)坐標和(he)縱坐標注釋及單位(wei)
4，選中數據，生成散點圖，注(zhu)意(yi)：一(yi)定(ding)一(yi)定(ding)一(yi)定(ding)要先選中數據(ju)，才能生成圖哦！
5，可以(yi)(yi)根據需求調整(zheng)散點圖橫縱坐標起始值(zhi)，及(ji)最大值(zhi)，間(jian)隔大小以(yi)(yi)及(ji)散點的(de)樣式，形狀或顏色。
6，開始擬合：激活Graph，選(xuan)中(zhong)散點圖(tu)的數據點。
注意：一定一定一定要先選中(zhong)(zhong)散點(dian)圖中(zhong)(zhong)的(de)點(dian)，再點(dian)擊(ji)工具欄！
點擊軟件(jian)上方的 Analysis→Fitting→NonLinearCurve Fit→Open Dialog
7，創建(jian)擬合方(fang)程
對話(hua)(hua)框中(zhong)，Category選(xuan)項選(xuan)擇“UserDefined”（用戶自定(ding)義），再(zai)點擊箭頭(tou)所指按鈕，打開創建新方(fang)程的對話(hua)(hua)框。對話(hua)(hua)框中(zhong)：Function Name一(yi)欄可對方(fang)程進行命名（僅(jin)限英文(wen)），此次(ci)命名為(wei)“LightCurveFit”；FunctionType一(yi)欄選(xuan)擇第二(er)個“Equations”，然后點擊next進行下一(yi)步。
8，編輯(ji)擬合方程
進(jin)入參(can)數設置，第(di)一行和(he)第(di)二行為自變量x和(he)因(yin)變量y，第(di)三行為你自己需要(yao)設置的(de)方程參(can)數，以一元二次方程為例，設置參(can)數a,b,c（字母和(he)標點符號必須是英文輸(shu)入法），然(ran)后點擊(ji)next進(jin)行下一步(bu)。
9，設置方程式
進入方程輸入，如圖，在紅線框出(chu)的地方輸入一(yi)元(yuan)二次方程。（字母(mu)和(he)符號必須是(shi)英文輸入法）。
y=x/(a*x^2+b*x+c)
到此處基本設置已完畢，一直點擊(ji)next即可，最后點擊(ji)finish！
10，開始擬合
點擊(ji)并(bing)切換至Parameters窗口，點擊(ji)Simplex擬(ni)合，直至Parameters內參(can)數不變，點擊(ji)Fit完成擬(ni)合。
點擊完(wan)Fit，可能會(hui)出(chu)現一個對(dui)話(hua)框，詢問是否(fou)切換(huan)到CurveFit Report Sheet。
11，查看擬合結果，修改(gai)擬合曲(qu)線注釋文本等
強烈建議：
分(fen)析結束后請盡快(kuai)通過(guo)File→Save Project保(bao)存工作流程。
擬(ni)合曲線可以(yi)通(tong)過File→Export Graph導出。
12，計算(suan)快速光曲(qu)線參數(shu)
測量光(guang)(guang)響應曲(qu)線時<Light Curve>程序連(lian)續照射幾(ji)個強度(du)逐(zhu)漸(jian)升高的光(guang)(guang)化(hua)光(guang)(guang)，一般情況下(xia)每(mei)個梯(ti)度(du)的光(guang)(guang)化(hua)光(guang)(guang)持(chi)續時間太短而不足以(yi)使(shi)光(guang)(guang)合(he)作(zuo)用(yong)達(da)到(dao)穩態(tai)。因此(ci)，此(ci)時的光(guang)(guang)響應曲(qu)線被稱為快速光(guang)(guang)曲(qu)線（RLC）。和(he)傳統(tong)的光(guang)(guang)響應曲(qu)線不同，快速光(guang)(guang)曲(qu)線反(fan)映了當前(qian)狀態(tai)下(xia)光(guang)(guang)合(he)作(zuo)用(yong)的信息。通(tong)過對(dui)快速光(guang)(guang)曲(qu)線進行(xing)擬(ni)合(he)，可以(yi)得到(dao)以(yi)下(xia)幾(ji)個主要參數：
? α，單位：electrons/photons，快速光曲線的初始斜率，反映了光能利用效率。
? ETRm，單位：μmol· m-2 · s-1，最大電子傳遞速率。
? Ek，單位：μmol· m-2 · s-1，最小飽和光強（半飽和光強），反映了樣品對強光的耐受能力。
PamWin-3采用Eilers and Peeters（1988）的公式對(dui)快速光曲線(xian)進行擬(ni)合，擬(ni)合公式如下：
各個(ge)參數的計算(suan)公式分別是：
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