軟(ruan)件：OriginPro9.1
素材：PAM熒光(guang)儀導出的(de)PAR和ETR數(shu)據。
操作(zuo)步驟
1，正確(que)安裝(zhuang)Origin軟件(jian)，打(da)開(kai)軟件(jian)
2，打開(kai)正確操作PAM測量(liang)得到的快速光(guang)曲線數(shu)據(ju)文件
3，將(jiang)PAR和(he)ETR的數據(ju)復(fu)制(zhi)到Origin軟件，并(bing)編(bian)輯橫坐(zuo)標和(he)縱坐(zuo)標注釋及單位(wei)
4，選中(zhong)數據，生成散點圖，注意(yi)：一定(ding)一定(ding)一定(ding)要先選中數(shu)據，才能(neng)生成圖哦！
5，可以根(gen)據需求(qiu)調整散(san)點圖橫縱坐標(biao)起始值，及最大值，間(jian)隔大小(xiao)以及散(san)點的樣式，形狀或顏色。
6，開始擬合：激活(huo)Graph，選中散點(dian)圖的數據點(dian)。
注意(yi)：一定一定一定要先選中散點圖中的點，再點擊工具欄！
點擊(ji)軟(ruan)件(jian)上方(fang)的 Analysis→Fitting→NonLinearCurve Fit→Open Dialog
7，創建擬合方程
對話框(kuang)(kuang)中，Category選(xuan)項選(xuan)擇“UserDefined”（用戶(hu)自定義），再(zai)點擊箭頭所指按鈕(niu)，打開創建新方程的對話框(kuang)(kuang)。對話框(kuang)(kuang)中：Function Name一(yi)欄(lan)(lan)可對方程進行(xing)命(ming)名（僅限英文），此次命(ming)名為“LightCurveFit”；FunctionType一(yi)欄(lan)(lan)選(xuan)擇第二個(ge)“Equations”，然后點擊next進行(xing)下一(yi)步。
8，編輯擬(ni)合方程
進入參(can)數(shu)設置(zhi)，第(di)一行和第(di)二行為自變量(liang)x和因變量(liang)y，第(di)三行為你自己(ji)需要設置(zhi)的方程(cheng)參(can)數(shu)，以一元二次方程(cheng)為例(li)，設置(zhi)參(can)數(shu)a,b,c（字母(mu)和標點符號必須是英文輸(shu)入法），然后點擊next進行下一步。
9，設置方程(cheng)式
進入(ru)方(fang)程(cheng)輸(shu)入(ru)，如圖，在紅線框(kuang)出(chu)的地方(fang)輸(shu)入(ru)一元二次(ci)方(fang)程(cheng)。（字母和符號必須是英文輸(shu)入(ru)法）。
y=x/(a*x^2+b*x+c)
到此(ci)處(chu)基本設置(zhi)已完畢，一直點(dian)擊(ji)next即可，最(zui)后點(dian)擊(ji)finish！
10，開始擬(ni)合
點(dian)擊并切換(huan)至(zhi)Parameters窗口，點(dian)擊Simplex擬合，直(zhi)至(zhi)Parameters內參數不變，點(dian)擊Fit完(wan)成擬合。
點擊完Fit，可(ke)能會出現(xian)一個對話框(kuang)，詢(xun)問是否切(qie)換到CurveFit Report Sheet。
11，查看擬(ni)合結果，修改(gai)擬(ni)合曲線注釋文本等
強烈(lie)建議：
分析結(jie)束后請盡快(kuai)通過File→Save Project保存工作(zuo)流程。
擬合(he)曲線可以通過(guo)File→Export Graph導(dao)出(chu)。
12，計算快速光曲(qu)線參數
測量(liang)光(guang)(guang)(guang)(guang)響應曲(qu)(qu)線(xian)(xian)時<Light Curve>程序連續照射(she)幾個(ge)強度逐(zhu)漸升高(gao)的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)化光(guang)(guang)(guang)(guang)，一般情況下(xia)每個(ge)梯度的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)化光(guang)(guang)(guang)(guang)持續時間太(tai)短而(er)不(bu)足以使光(guang)(guang)(guang)(guang)合(he)(he)作用達到穩態。因此，此時的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)響應曲(qu)(qu)線(xian)(xian)被(bei)稱為快速光(guang)(guang)(guang)(guang)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)（RLC）。和(he)傳統的(de)(de)光(guang)(guang)(guang)(guang)響應曲(qu)(qu)線(xian)(xian)不(bu)同，快速光(guang)(guang)(guang)(guang)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)反映了當前(qian)狀態下(xia)光(guang)(guang)(guang)(guang)合(he)(he)作用的(de)(de)信息。通過對快速光(guang)(guang)(guang)(guang)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)進行擬合(he)(he)，可以得到以下(xia)幾個(ge)主要參數：
? α，單位：electrons/photons，快速光曲線的初始斜率，反映了光能利用效率。
? ETRm，單位：μmol· m-2 · s-1，最大電子傳遞速率。
? Ek，單位：μmol· m-2 · s-1，最小飽和光強（半飽和光強），反映了樣品對強光的耐受能力。
PamWin-3采用Eilers and Peeters（1988）的公(gong)式對(dui)快速光曲線(xian)進行擬合，擬合公(gong)式如(ru)下：
各(ge)個參數的計算公式分別是(shi)：
以上Origin9.1進行(xing)PAM熒光儀快速光曲線擬合操(cao)作(zuo)指南請參考(kao)！如有(you)其(qi)他(ta)技術問題(ti)，請聯系上海澤泉科技股份(fen)有(you)限公司！