腫瘤(liu)患者來源(yuan)的(de)(de)(de)異種移植(PDX)是進(jin)(jin)行(xing)化(hua)(hua)療藥物敏感性(xing)和(he)(he)毒性(xing)評估的(de)(de)(de)有(you)(you)效(xiao)手段，對預(yu)測化(hua)(hua)療療效(xiao)至(zhi)關重要。細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)亡(wang)(wang)或程序性(xing)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)死亡(wang)(wang)可為(wei)(wei)吞(tun)噬細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)清除(chu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)提(ti)供(gong)重要信(xin)號(hao)，也可調控廣(guang)泛(fan)微環境中細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)信(xin)號(hao)轉導(dao)。細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)亡(wang)(wang)首先(xian)在(zai)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)表(biao)面(mian)形成(cheng)質(zhi)(zhi)(zhi)膜泡，隨后產生(sheng)薄膜包(bao)埋，包(bao)括質(zhi)(zhi)(zhi)膜上的(de)(de)(de)微管峰、凋(diao)亡(wang)(wang)和(he)(he)珠(zhu)狀結構，最(zui)終導(dao)致(zhi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)分裂和(he)(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)物質(zhi)(zhi)(zhi)分布到亞(ya)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)體(ti)和(he)(he)小微泡中。所有(you)(you)這些具(ju)有(you)(you)不同大小、形狀和(he)(he)內(nei)部組成(cheng)的(de)(de)(de)膜結合凋(diao)亡(wang)(wang)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)外小泡（1-5μm）統稱(cheng)為(wei)(wei)凋(diao)亡(wang)(wang)小體(ti)（ABs）。在(zai)藥物處理(li)下(xia)分泌到培養基中的(de)(de)(de)亞(ya)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)凋(diao)亡(wang)(wang)小體(ti)(ABs)和(he)(he)微泡（MVs），可作為(wei)(wei)藥物敏感性(xing)的(de)(de)(de)標(biao)志物。目(mu)前(qian)，實體(ti)瘤(liu)的(de)(de)(de)體(ti)外藥物敏感性(xing)評估主要通(tong)過(guo)(guo)：一、對貼壁(bi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)進(jin)(jin)行(xing)顯微鏡鏡檢分析(xi)ABs細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)數(shu)量和(he)(he)形狀；二、流(liu)式細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)儀測量統計凋(diao)亡(wang)(wang)條件下(xia)ABs和(he)(he)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)數(shu)量，并(bing)根據熒(ying)(ying)光(guang)染(ran)色結果鑒(jian)定細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)大小并(bing)進(jin)(jin)行(xing)分類。然而由于ABs復雜多樣，很難(nan)確定每種AB型的(de)(de)(de)適配熒(ying)(ying)光(guang)染(ran)料并(bing)預(yu)估ABs對不同染(ran)料滲透動力(li)學的(de)(de)(de)依賴性(xing)，因(yin)此(ci)利用流(liu)式細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)儀量化(hua)(hua)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)分解過(guo)(guo)程存(cun)在(zai)極大的(de)(de)(de)挑戰。阻抗(kang)流式細胞儀（Ampha Z32，Amphasys AG）作為一種(zhong)測量單(dan)細胞電(dian)生理學特性的(de)有效工具(ju)，已廣泛應用(yong)于無標記高通(tong)量無損評估細胞的(de)活(huo)力與數量。近期，美國弗吉尼亞大學的科研人員利用阻抗流式(shi)細(xi)胞儀(yi)Ampha Z32測定分(fen)析(xi)了經吉西(xi)他濱處(chu)理的胰腺腫(zhong)瘤培養基上清液(ye)中ABs，所得測量結果（高頻阻抗相位(wei)與(yu)大小分(fen)布）與(yu)常規方法提取出的凋亡細(xi)胞所表現出表型特征一致(zhi)，結合介電質(zhi)多殼模(mo)型(xing)還可用(yong)于ABs分類（基于尺(chi)寸和形(xing)狀），如：具(ju)(ju)有低阻(zu)抗相位（＜0.3）的(de)(de)(de)＜2.6μm小(xiao)球(qiu)形(xing)囊(nang)泡(pao)；具(ju)(ju)有高(gao)阻(zu)抗相位（＜0.5）的(de)(de)(de)中等尺(chi)寸扁球(qiu)形(xing)囊(nang)泡(pao)（3-8μm）；以及(ji)可能(neng)由球(qiu)形(xing)或(huo)長形(xing)囊(nang)泡(pao)產生的(de)(de)(de)具(ju)(ju)有低阻(zu)抗相位（＜0.3）的(de)(de)(de)較寬(kuan)尺(chi)寸囊(nang)泡(pao)（3-14μm），這是常規流式細胞儀（FACS Calibur，BD Biosciences）所不能(neng)實現的(de)(de)(de)。可見，阻抗流式(shi)細胞儀（Ampha Z32，Amphasys AG）可作(zuo)為檢測胰腺腫瘤微環(huan)境模(mo)型(xing)培養基中的ABs的有效工具，準確評估患者(zhe)源性(xing)腫瘤對化療藥(yao)物的藥(yao)物敏感性(xing)和毒性(xing)。
圖1 A）建立(li)胰腺癌(ai)（PDAX）患者來源的(de)(de)異(yi)種移(yi)植模型(xing)測(ce)定對吉(ji)西他(ta)濱的(de)(de)藥物敏感性；B）阻抗流式細胞儀（Ampha Z32，Amphasys AG）檢測(ce)示(shi)意(yi)圖(tu)；C）吉(ji)西他(ta)濱誘導凋(diao)亡(wang)細胞解(jie)體產生的(de)(de)各種表型(xing)和形(xing)態的(de)(de)凋(diao)亡(wang)小體ABs
圖1B 阻(zu)抗流式細胞儀（Ampha Z32，Amphasys AG）信號的采集和(he)轉導(dao)A）細(xi)(xi)(xi)胞(bao)在不同頻率的交流(liu)(liu)電(dian)(dian)場中(zhong)的檢測結果，低頻下反(fan)映細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的體積(ji)特性(xing)(xing)(xing)，高頻下反(fan)映細(xi)(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)的介電(dian)(dian)特性(xing)(xing)(xing)即細(xi)(xi)(xi)胞(bao)活(huo)性(xing)(xing)(xing)；B) 微流(liu)(liu)控芯片；C）流(liu)(liu)經交流(liu)(liu)電(dian)(dian)場的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的阻(zu)抗(kang)(kang)(kang)信號(hao)(hao)（藍(lan)色實部(bu)即電(dian)(dian)阻(zu)信號(hao)(hao)，綠色虛部(bu)即容(rong)性(xing)(xing)(xing)電(dian)(dian)抗(kang)(kang)(kang)信號(hao)(hao)），細(xi)(xi)(xi)胞(bao)膜(mo)完整性(xing)(xing)(xing)決定容(rong)性(xing)(xing)(xing)電(dian)(dian)抗(kang)(kang)(kang)的大小，故(gu)可通過虛部(bu)信號(hao)(hao)來區分活(huo)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)和死細(xi)(xi)(xi)胞(bao)，最終以阻(zu)抗(kang)(kang)(kang)相位角(jiao)-振幅散點圖反(fan)映出(chu)來阻(zu)(zu)抗流式細(xi)(xi)胞(bao)儀（Ampha Z32，Amphasys AG），通(tong)(tong)過(guo)檢測(ce)流經(jing)交流電(dian)場的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)懸(xuan)浮(fu)液中細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)電(dian)阻(zu)(zu)抗信號(hao)，分(fen)析獲(huo)得細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)數量、大小、活(huo)性(xing)。該儀器可以在0.3-30MHz的(de)(de)范(fan)圍(wei)內同時測(ce)量4個不同頻率下細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)電(dian)阻(zu)(zu)抗特性(xing)，適配微流控芯片通(tong)(tong)道尺寸范(fan)圍(wei)為(wei)15-400μm（圖1B），可滿足0-300μm范(fan)圍(wei)內的(de)(de)任意生物、非生物單細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)活(huo)性(xing)測(ce)量。電(dian)場中(zhong)活細胞的等效(xiao)電(dian)路由電(dian)阻(zu)（細胞質）和電(dian)容（細胞膜）組成(cheng)，在笛(di)卡爾坐標系中(zhong)，阻(zu)抗Z（ω）可以描述為(wei)實部分Zr（ω）或(huo)電(dian)阻(zu)與虛部分Zi（ω）或(huo)容性電(dian)抗的矢量(liang)和。
相(xiang)位角（θ）描述電阻(zu)和電抗之間的關系(xi)：
阻(zu)抗指(zhi)數(shu)即振幅表示為：
圖2 流式細胞儀（FACS Calibur，BD Biosciences）評估吉西(xi)他濱誘導下PDAC細胞系(xi)的凋亡變化(hua)
其(qi)中圖2A）顯(xian)示(shi)了暴露于(yu)不同濃(nong)度(du)（0.01、0.1和1 μg·mL-1）吉西他濱(bin)下的(de)(de)(de)PDAC細胞系在不同處理時間[24 h（●）、48 h（■）和 96 h（▲）]的(de)(de)(de)相對于(yu)對照組的(de)(de)(de)增(zeng)值狀態（%）。從圖中可以看(kan)出，0.01 μg·mL-1的(de)(de)(de)藥物(wu)濃(nong)度(du)下，短時間內(nei)（24 h和48 h）幾乎對細胞增(zeng)殖無影響，而0.1和1 μg·mL-1的(de)(de)(de)藥物(wu)濃(nong)度(du)下48h和96h后，細胞增(zeng)殖水(shui)平急劇下降至≈-50%。也就是說隨藥物(wu)劑量增(zeng)加和暴露時間的(de)(de)(de)延長，細胞增(zeng)殖下降，這說明(ming)吉西他濱(bin)對PDAC細胞系有化療效果。圖2B)為不同(tong)濃(nong)度(du)吉西他濱下暴露(lu)48h后的(de)PDAC細胞(bao)(bao)顯(xian)微(wei)圖像（63 obj，2.5optovar，Zeiss Observer 7），其中凸起（0.01 μg·mL-1）、氣泡（0.1 μg·mL-1）及珠狀結(jie)(jie)構（1 μg·mL-1）均(jun)為細胞(bao)(bao)凋亡過(guo)程的(de)關鍵(jian)特(te)征(zheng)，會(hui)進一步形成具有特(te)定組(zu)成和(he)結(jie)(jie)構的(de)ABs。圖2C)對不同濃度吉西他濱下暴露48h后的PDAC細胞進行流式細胞分析所得到細胞（i-iv）和亞細胞（v-viii）的密度散點圖。其中膜聯蛋白V (AnnexinV)與DAPI作為染色標記物。圖中AV-DAPI-門控內為未染色的活細胞；AV＋DAPI-門控內為細胞膜完整的處于凋亡早期至中期的細胞；DAPI＋門控(kong)內為具有通透性膜的失活細胞。圖2D)和E)分別為不(bu)同(tong)濃度(du)不(bu)同(tong)暴露時間下，細(xi)胞（Cells）和亞(ya)(ya)細(xi)胞（Sub-Cells）中AV-DAPI-、AV+DAPI-和DAPI+門控中的(de)亞(ya)(ya)群(qun)占比(bi)。其(qi)中在高濃度(du)吉西他(ta)濱治療條(tiao)件下（48 h，0.1和1 μg·mL-1），DAPI+細(xi)胞的(de)比(bi)率降低，其(qi)中AV＋DAPI-細(xi)胞（即早期/中期凋(diao)亡細(xi)胞）的(de)比(bi)率顯著增加(jia)（圖2D），表(biao)明此時藥物(wu)開始誘導的(de)細(xi)胞凋(diao)亡；AV＋DAPI-亞(ya)(ya)細(xi)胞比(bi)例(li)從≈10–30%上升至≈60%（圖2E），這可能對應(ying)于凋(diao)亡細(xi)胞分解過(guo)程中產(chan)生(sheng)的(de)較大的(de)ABs。圖2C-vii、viii中的(de)箭頭指示出不(bu)同(tong)的(de)ABs亞(ya)(ya)型(xing)(xing)，但由(you)于遺(yi)傳物(wu)質和膜(mo)構象(xiang)的(de)差異(yi)，不(bu)同(tong)ABs亞(ya)(ya)型(xing)(xing)需要適配(pei)不(bu)同(tong)的(de)染色劑，故很難(nan)通過(guo)流式(shi)細(xi)胞儀進(jin)行具體(ti)區分。
圖3 阻抗流式細胞儀（Ampha Z32，Amphasys AG）評估吉西他濱誘導下PDAC細胞系的凋亡變化圖(tu)3中(zhong)(zhong)A-D分(fen)別(bie)為不同(tong)濃度（0、0.01、0.1和1 μg·mL-1）的(de)(de)(de)(de)(de)吉(ji)西他濱下(xia)(xia)暴露(lu)于48 h后的(de)(de)(de)(de)(de)PDAC細(xi)(xi)胞(bao)(bao)電直徑與阻抗相位(wei)(wei)(wei)的(de)(de)(de)(de)(de)密度散點圖(tu)。其中(zhong)(zhong)，阻抗流(liu)式(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)儀(yi)在(zai)低(di)頻電場(0.5 MHz)下(xia)(xia)測(ce)量得到的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)阻抗振幅(IZI)可(ke)用于評(ping)估細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)電直徑（），而在(zai)高頻電場（18 MHz）下(xia)(xia)的(de)(de)(de)(de)(de)阻抗相位(wei)(wei)(wei)（）則可(ke)用來評(ping)估細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)介電特性(xing)，7 μm聚苯乙烯珠(zhu)的(de)(de)(de)(de)(de)電直徑-阻抗相位(wei)(wei)(wei)值可(ke)作為參考設置細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和亞(ya)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)門控。圖(tu)E）和F）分(fen)別(bie)顯示了在(zai)不同(tong)濃度藥(yao)物(wu)下(xia)(xia)，阻抗流(liu)式(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)儀(yi)和流(liu)式(shi)(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)儀(yi)分(fen)析獲(huo)得的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和亞(ya)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)占(zhan)比(bi)(bi)，從(cong)圖(tu)中(zhong)(zhong)可(ke)以看出，0.1和1 μg·mL-1藥(yao)物(wu)水平下(xia)(xia)的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)占(zhan)比(bi)(bi)顯著(zhu)下(xia)(xia)降（*p<0.05），這是由于藥(yao)物(wu)治療(liao)下(xia)(xia)，PDAC細(xi)(xi)胞(bao)(bao)凋亡(wang)并促使亞(ya)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)凋亡(wang)小體ABs的(de)(de)(de)(de)(de)釋放(fang)。
圖4 A-C分別為不同藥物濃度、不同暴露時間下，A）細胞亞群的占比的變化；B）細胞的阻抗相位變化以及C）亞細胞的阻抗相位變化；D）細胞與E）亞細胞的歸一化阻抗相位（φZ18 MHz）分布趨勢（對照組與暴露于1 μg·mL-1吉西他濱下24 h和48 h的處理組，以7 μm聚苯乙烯珠在18 MHz下的阻抗相位（φZ18 MHz）為參考進行標準化處理）；F）暴露于不同濃度吉西他濱下24 h和48 h的細胞和亞細胞與對照組的差分阻抗相位比較。從圖中可以(yi)看出，細(xi)(xi)(xi)胞(bao)及亞(ya)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)阻(zu)(zu)抗(kang)相(xiang)位(wei)均隨(sui)著藥(yao)物(wu)濃度升高及暴露時間的延長而(er)降(jiang)低，這(zhe)是(shi)(shi)由于(yu)隨(sui)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)的凋亡，細(xi)(xi)(xi)胞(bao)內(nei)部電導(dao)率（σint）下降(jiang)，從而(er)反映(ying)出細(xi)(xi)(xi)胞(bao)阻(zu)(zu)抗(kang)相(xiang)位(wei)的下降(jiang)，這(zhe)與使(shi)用(yong)雙相(xiang)電泳觀察到的凋亡細(xi)(xi)(xi)胞(bao)所反映(ying)出的狀態一(yi)致，這(zhe)種效應(ying)可能與細(xi)(xi)(xi)胞(bao)凋亡過程中細(xi)(xi)(xi)胞(bao)內(nei)離(li)子（主要是(shi)(shi)K+和Na+）的流出有關。特別值(zhi)得(de)注意的是，阻抗流式(shi)細胞(bao)儀（Ampha Z32，Amphasys AG）對細胞(bao)凋亡過程的捕捉比流式(shi)細胞(bao)儀更為靈敏，其可(ke)(ke)在(zai)較低藥物濃度（和(he)(he)暴(bao)露時(shi)間）下檢(jian)測出細(xi)胞(bao)(bao)阻抗(kang)相位的(de)變化(hua)（圖(tu)4D、E與(yu)圖(tu)2C、D）。總體(ti)來看，細(xi)胞(bao)(bao)和(he)(he)亞細(xi)胞(bao)(bao)的(de)歸一(yi)(yi)化(hua)阻抗(kang)相位（圖(tu)4D、E）分布(bu)趨勢相似(si)，但(dan)亞細(xi)胞(bao)(bao)群體(ti)的(de)阻抗(kang)相位下降幅度更(geng)大(da)，這說明(ming)兩個類(lei)群的(de)表(biao)型(xing)相似(si)，但(dan)亞細(xi)胞(bao)(bao)對(dui)凋亡的(de)發(fa)生(sheng)更(geng)加敏(min)感。根(gen)據阻抗(kang)相位的(de)變化(hua)，或可(ke)(ke)進一(yi)(yi)步(bu)進行各種ABs亞型(xing)，如(ru)：較小的(de)微泡、ABs珠狀(zhuang)聚集(ji)體(ti)和(he)(he)細(xi)胞(bao)(bao)解體(ti)產生(sheng)的(de)較大(da)ABs（圖(tu)1C）的(de)分類(lei)研究。
圖5 阻(zu)抗流式細胞儀與流式細胞儀檢測(ce)結果比較為優化(hua)阻(zu)抗(kang)流式(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)儀（AmphaZ32，Amphasys AG）單細(xi)(xi)(xi)胞(bao)檢(jian)測的(de)(de)(de)(de)信噪(zao)比(bi)，以(yi)識別不同ABs亞(ya)(ya)型(xing)的(de)(de)(de)(de)電(dian)生理(li)學(xue)的(de)(de)(de)(de)差異(yi)，本研(yan)究利用5μm聚(ju)苯(ben)乙(yi)烯(xi)參考珠的(de)(de)(de)(de)檢(jian)測結(jie)果(guo)進行尺(chi)寸(cun)標準(zhun)化(hua)，并結(jie)合單一頻率的(de)(de)(de)(de)（10 MHz）阻(zu)抗(kang)相(xiang)(xiang)(xiang)位和電(dian)直(zhi)(zhi)徑(jing)結(jie)果(guo)繪制了(le)對(dui)照(zhao)組(zu)(zu)(zu)（圖5A）和1 μg·mL-1吉(ji)西他濱處理(li)組(zu)(zu)(zu)（圖5B）的(de)(de)(de)(de)ABs電(dian)直(zhi)(zhi)徑(jing)-阻(zu)抗(kang)相(xiang)(xiang)(xiang)位3D密度分(fen)布圖。對(dui)比(bi)可見，對(dui)照(zhao)組(zu)(zu)(zu)與處理(li)組(zu)(zu)(zu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數量存在顯(xian)著(zhu)差異(yi)（圖C，**p＜0.01），且處理(li)組(zu)(zu)(zu)含有三個不同ABs亞(ya)(ya)群：低阻(zu)抗(kang)相(xiang)(xiang)(xiang)位的(de)(de)(de)(de)小(xiao)囊(nang)泡(pao)（＜0.3）、高阻(zu)抗(kang)相(xiang)(xiang)(xiang)位的(de)(de)(de)(de)中型(xing)亞(ya)(ya)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)體（＞0.5）和低阻(zu)抗(kang)相(xiang)(xiang)(xiang)位的(de)(de)(de)(de)較大尺(chi)寸(cun)的(de)(de)(de)(de)亞(ya)(ya)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)體（＜0.3）。流式(shi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)儀的(de)(de)(de)(de)檢(jian)測結(jie)果(guo)同樣顯(xian)示出對(dui)照(zhao)組(zu)(zu)(zu)與處理(li)組(zu)(zu)(zu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)數量間(jian)的(de)(de)(de)(de)顯(xian)著(zhu)差異(yi)（圖F，**p＜0.01），但卻(que)無法從FSC、SSC或膜聯(lian)蛋白V染(ran)色(se)結(jie)果(guo)進行ABs亞(ya)(ya)群尤其是較大尺(chi)寸(cun)（中值電(dian)直(zhi)(zhi)徑(jing)＞2.6 μm）亞(ya)(ya)群的(de)(de)(de)(de)區分(fen)（圖5D，F）。
圖6 ABs表型(xing)的(de)介電(dian)模型(xing)暴露(lu)于1 μg·mL-1吉西他濱下48 h的(de)處理組ABs在10 MHz下的(de)阻抗相(xiang)(xiang)位(wei)分(fen)(fen)布如(ru)圖(tu)(tu)(tu)中(zhong)圖(tu)(tu)(tu)6A）和(he)B）中(zhong)實線所示。為對ABs表型進行準確(que)分(fen)(fen)類，本研究通過單一高斯分(fen)(fen)布（圖(tu)(tu)(tu)6A，A-1高斯模型R2=0.9686）來擬合確(que)定(ding)＜2.6 μm的(de)ABs亞群(qun)的(de)阻抗相(xiang)(xiang)位(wei)分(fen)(fen)布的(de)峰值位(wei)置（0.28），通過雙(shuang)高斯分(fen)(fen)布（圖(tu)(tu)(tu)6B虛線，B-2高斯模型R2=0.9852）擬合確(que)定(ding)電直(zhi)徑＞2.6 μm的(de)ABs亞群(qun)（對應圖(tu)(tu)(tu)5B的(de)兩(liang)個亞群(qun)）阻抗相(xiang)(xiang)位(wei)分(fen)(fen)布的(de)峰值位(wei)置（0.29和(he)0.59）。顯(xian)微鏡觀察到亞(ya)細(xi)胞體呈球形(xing)、扁長形(xing)和(he)扁圓(yuan)形(xing)（圖1C）等多種亞(ya)型，形(xing)狀因細(xi)胞系、藥物誘導(dao)等因素(su)而(er)異(yi)。我們雖然很難通(tong)過(guo)阻(zu)抗(kang)(kang)流式(shi)細(xi)胞儀直接識別(bie)出這些形(xing)狀特征，但卻可以(yi)利(li)用不同形(xing)狀對(dui)電(dian)極化(hua)的(de)強烈影響而(er)產生的(de)阻(zu)抗(kang)(kang)數據差異(yi)進(jin)行形(xing)狀的(de)區分。本研究(jiu)基于ABs球形(xing)度-電(dian)直徑(jing)變化(hua)所引起的(de)阻(zu)抗(kang)(kang)相(xiang)位(wei)(wei)(wei)（φZ10 MHz）的(de)變化(hua)創建(jian)了ABs表型的(de)介電(dian)多殼模型，該(gai)模型（圖6C）可顯(xian)示特定大小(xiao)和(he)形(xing)狀下的(de)ABs阻(zu)抗(kang)(kang)相(xiang)位(wei)(wei)(wei)（φZ10 MHz）的(de)差異(yi)，其(qi)中有低阻(zu)抗(kang)(kang)相(xiang)位(wei)(wei)(wei)（＜0.3）的(de)＜2.6μm的(de)為(wei)小(xiao)球形(xing)囊(nang)泡(pao)，高阻(zu)抗(kang)(kang)相(xiang)位(wei)(wei)(wei)（＜0.5）的(de)中等尺(chi)寸扁球形(xing)囊(nang)泡(pao)（3-8 μm），以(yi)及可能由(you)球形(xing)或長形(xing)囊(nang)泡(pao)產生的(de)具有低阻(zu)抗(kang)(kang)相(xiang)位(wei)(wei)(wei)（＜0.3）的(de)較(jiao)寬尺(chi)寸的(de)囊(nang)泡(pao)（3-14 μm）。此研(yan)究表明(ming)，阻(zu)抗流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)可高通(tong)量快速無(wu)損(sun)評估(gu)患者源性(xing)腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)對藥物的敏感(gan)性(xing)，不(bu)(bu)僅免(mian)除(chu)了費力耗力的細(xi)胞(bao)收集和(he)染(ran)色(se)標記過程，還可避免(mian)因染(ran)色(se)不(bu)(bu)當所造(zao)成的細(xi)胞(bao)凋亡。除(chu)此之外，阻(zu)抗流式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)還可在不(bu)(bu)同(tong)的腫瘤(liu)微環境模型和(he)藥物類型下通(tong)過追蹤(zong)ABs表型來確定細(xi)胞(bao)凋亡過程，以更準確的衡量藥物敏感(gan)性(xing)和(he)毒性(xing)。Carlos Honrado, Sara J. Adair, Nathan S. Swami, et al. . Adv. Biology 2021, 2100438
