細(xi)胞(bao)(bao)活(huo)力的(de)測(ce)(ce)定(ding)在生命科學和(he)生物(wu)技術的(de)許(xu)多領(ling)域都是必不(bu)可(ke)(ke)少的(de)環節(jie)。傳統上，細(xi)胞(bao)(bao)活(huo)力通常(chang)通過寬視野光(guang)學顯微(wei)(wei)照片中(zhong)染(ran)色細(xi)胞(bao)(bao)的(de)半自動或自動計數來(lai)確定(ding)，通常(chang)這(zhe)種檢(jian)(jian)測(ce)(ce)方法需要額外的(de)染(ran)色標記過程，故很難(nan)作為(wei)在線或原位快速(su)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)的(de)手段。Ampha Z32微(wei)(wei)流控阻抗(kang)流式(shi)細(xi)胞(bao)(bao)儀（IFC）是一種基于(yu)Coulter原理的(de)無(wu)需標記的(de)單細(xi)胞(bao)(bao)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)技術，可(ke)(ke)在線快速(su)、準確測(ce)(ce)定(ding)懸浮(fu)液中(zhong)單細(xi)胞(bao)(bao)的(de)活(huo)性狀態。Ampha Z32不(bu)含光(guang)學元件，無(wu)需調整(zheng)和(he)校準，便于(yu)攜帶，不(bu)僅可(ke)(ke)在實(shi)(shi)驗室使用(yong)，還同(tong)樣(yang)適用(yong)于(yu)實(shi)(shi)驗室外的(de)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)。此(ci)前，Ampha Z32多用(yong)于(yu)花粉質量(liang)分(fen)析，但(dan)目前其也逐(zhu)步(bu)應用(yong)到細(xi)胞(bao)(bao)生物(wu)學的(de)許(xu)多領(ling)域，如(ru)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)癌細(xi)胞(bao)(bao)的(de)活(huo)力、分(fen)化和(he)凋亡（）；監測牛紅細胞(bao)寄生(sheng)蟲感染過程；成(cheng)纖維(wei)細胞(bao)分化為脂肪(fang)細胞(bao)的研究；甚至是納(na)米材料毒性評(ping)估（）等方面。本文利用Ampha Z32精確并(bing)快速的(de)評估了(le)(le)正常和熱滅活、發酵過程(cheng)中(zhong)以(yi)及長(chang)期(qi)好氧(yang)間歇培養過程(cheng)中(zhong)酵母細(xi)胞的(de)細(xi)胞活力和細(xi)胞狀(zhuang)態，并(bing)與常規(gui)染色方法進行了(le)(le)比較。此外，還(huan)監(jian)測了(le)(le)感染桿狀(zhuang)病毒后昆(kun)蟲細(xi)胞活性(xing)的(de)變化并(bing)預(yu)測了(le)(le)胞內蛋白的(de)理想收獲時間。釀(niang)酒(jiu)酵母(mu)細(xi)胞的活(huo)性檢(jian)測(ce)
圖1 IFC法(fa)與PI熒光染色法(fa)測定的酵母活性(xing)的相關(guan)性(xing)A）10MHz頻率下釀酒酵母（Scc ATCC 9080）活細胞(bao)（未處理(li)；綠(lv)點）和(he)死細胞(bao)（熱處理(li)；紅點）的IFC相(xiang)位角(jiao)（x軸(zhou)）-振幅（y軸(zhou)）疊(die)加散點圖(tu)；B）IFC法(fa)（n=3，std=0.15%）和(he)染色法(fa)（n=3，std=4.4%）的相(xiang)關性分析（R2=0.996）IFC法：本實驗中未經處理(li)和熱處理(li)的酵母死細胞樣品按預定(ding)(ding)比例（1:0、3:1、1:1、1:3、0:1）混合至100μl，之后用(yong)AF6緩沖液進(jin)一步稀釋至2ml，經20μm過濾器過濾后上(shang)機(ji)測試，三次重復，細胞采集(ji)數(shu)目設(she)定(ding)(ding)為20000。PI法：200μl AF6和100μl 3.0μg/ml碘化丙啶（PI）稀釋100μl上述未經處理/熱處理的細胞(bao)混(hun)合物(wu)，并使用(yong)熒光顯微鏡（Leica）計數PI染色(se)（死(si)亡）和未染色(se)（存活）細胞(bao)。實驗結果表明，相較于傳統染(ran)色(se)鏡檢(jian)法，Ampha Z32阻抗(kang)流式(shi)細胞儀（IFC）操(cao)作簡單、測量(liang)快速，是一種統計性、重(zhong)復性、測量(liang)精度以(yi)及(ji)標準化(hua)程度都更高的檢(jian)測方法。常規培養下和兩(liang)性霉素B（Sigma）處理后釀酒酵母活性的(de)變化(hua)
圖2 常規培養下(xia)釀酒酵母（Scc ATCC9080）活(huo)性的變化（IFC法(fa)）
圖3. 常規培養下和兩(liang)性霉素B（Sigma）處理后釀酒酵母(mu)活性的(de)變化A）常規培養下，釀(niang)酒酵(jiao)母（Scc ATCC 9080）活性相位直(zhi)方圖隨時間的變化（10 MHz）。B）酵母活性(xing)隨培養時間的(de)變(bian)化(hua)曲線。C）在(zai)添加1μg/ml的(de)兩性(xing)霉素B后(hou)的(de)0-5h內，釀酒(jiu)酵(jiao)母（Scc ATCC 9080）活性(xing)相(xiang)位直方圖(tu)的(de)變化釀酒酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)（Scc ATCC 9080）常規培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)，即(ji)250 ml錐形瓶中(zhong)在28°C的(de)(de)搖動(dong)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)箱中(zhong)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)數天(tian)(tian)，培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基為100 ml YPD。兩(liang)(liang)性霉(mei)素(su)(su)B（Sigma）處(chu)理(li)，即(ji)將(jiang)常規培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)中(zhong)處(chu)于(yu)指數生長時期的(de)(de)釀酒酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)胞(bao)(bao)暴(bao)露于(yu)1μg/ml的(de)(de)兩(liang)(liang)性霉(mei)素(su)(su)B中(zhong)。圖(tu)(tu)(tu)(tu)2為接種(zhong)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)后的(de)(de)第1、7和14天(tian)(tian)，釀酒酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)的(de)(de)相(xiang)位-振幅散點(dian)圖(tu)(tu)(tu)(tu)的(de)(de)變(bian)化(hua)，從圖(tu)(tu)(tu)(tu)中(zhong)可以看出，在接種(zhong)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)的(de)(de)第7天(tian)(tian)出現(xian)兩(liang)(liang)個明顯可區分的(de)(de)類群(qun)。在培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)的(de)(de)18天(tian)(tian)中(zhong)，可以清晰看到活(huo)性酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)類群(qun)的(de)(de)逐漸向低相(xiang)位和較小振幅移(yi)動(dong)（圖(tu)(tu)(tu)(tu)3A），也就是說，隨著培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)時間的(de)(de)延長，酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)胞(bao)(bao)活(huo)性逐漸下降（圖(tu)(tu)(tu)(tu)3B）。此過(guo)(guo)程(cheng)(cheng)反(fan)映了(le)在長期好氧間歇培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)中(zhong)，因營(ying)養(yang)(yang)限(xian)制而導致的(de)(de)酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)死亡(wang)過(guo)(guo)程(cheng)(cheng)。圖(tu)(tu)(tu)(tu)3C同樣觀(guan)察到經兩(liang)(liang)性霉(mei)素(su)(su)B（Sigma）處(chu)理(li)后，釀酒酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)活(huo)性逐漸降低，但這一過(guo)(guo)程(cheng)(cheng)反(fan)映的(de)(de)是毒(du)性化(hua)合物誘導下酵(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)死亡(wang)過(guo)(guo)程(cheng)(cheng)。這表(biao)明IFC還可應用于(yu)懸浮細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)無(wu)標記(ji)毒(du)理(li)學研究，例(li)如用于(yu)IC50值的(de)(de)測(ce)定。釀(niang)啤酒(jiu)造(zao)過程中釀(niang)酒(jiu)酵母(mu)活性的變(bian)化
圖(tu)4. 釀啤酒(jiu)造過程中釀酒(jiu)酵母活性的變化A） 開(kai)始發酵后的前(qian)3天，酵母(mu)細胞的相位-振幅散點圖變化。B） 發(fa)酵過程中的(de)酵母(mu)細胞的(de)密度(du)（黑色(se)(se)）、活力（橙(cheng)色(se)(se)）和乙醇濃度(du)（藍色(se)(se)）隨時間的(de)變化(hua)。啤(pi)酒(jiu)釀(niang)造發(fa)酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)罐中的(de)(de)生(sheng)長(chang)條(tiao)件(jian)與前面討(tao)論的(de)(de)情況不同(tong)，圖4記錄(lu)了酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)的(de)(de)發(fa)酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)過程(cheng)，開始的(de)(de)第(di)1天（紅色）到(dao)第(di)2天（綠色），酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)呈指數增殖，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)濃(nong)(nong)度(du)(du)從(cong)(cong)5.4增加(jia)到(dao)25.3 x 106細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)/ml，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)活力(li)從(cong)(cong)57.1增加(jia)到(dao)83.9%（圖4B）。第(di)3天結(jie)束時，酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)（藍色）移(yi)向較低(di)的(de)(de)相角，這意味著細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)濃(nong)(nong)度(du)(du)的(de)(de)增長(chang)減慢，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)活力(li)下降(jiang)。而發(fa)酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)罐中乙醇(chun)濃(nong)(nong)度(du)(du)從(cong)(cong)第(di)一(yi)天的(de)(de)0.1%迅速增加(jia)到(dao)第(di)三天的(de)(de)3.1%（圖4B）。這是由于培養第(di)一(yi)天細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)濃(nong)(nong)度(du)(du)低(di)、活力(li)低(di)且發(fa)酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)罐中仍存在大量氧(yang)氣(qi)，當發(fa)酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)罐中的(de)(de)氧(yang)氣(qi)全部消耗(hao)完(wan)后(hou)，酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)轉入厭氧(yang)乙醇(chun)發(fa)酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)，乙醇(chun)濃(nong)(nong)度(du)(du)迅速增加(jia)，而乙醇(chun)濃(nong)(nong)度(du)(du)增加(jia)又(you)會對酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)產生(sheng)毒性(xing)，故酵(jiao)(jiao)(jiao)(jiao)母(mu)(mu)(mu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)活性(xing)降(jiang)低(di)。IFC的(de)(de)檢測到(dao)的(de)(de)活性(xing)相位變(bian)化與以上響應過程(cheng)高度(du)(du)一(yi)致。本文利用Ampha Z32（IFC）分別(bie)跟蹤了感(gan)染(ran)(ran)和未感(gan)染(ran)(ran)染(ran)(ran)桿狀病毒（BV）的(de)Sf9昆(kun)蟲細(xi)胞培養物在首次傳代后的(de)99h內的(de)活(huo)力變化。
圖5 感染桿狀病毒（BV）后的Sf9昆(kun)蟲細胞(bao)活性(xing)的變化
圖S4 感(gan)染桿(gan)狀病毒（BV）后的Sf9昆(kun)蟲細(xi)胞(bao)活性(xing)相位疊加圖上圖(tu)為Sf9昆蟲細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)在感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染桿狀病(bing)毒后(hou)的(de)(de)(de)(de)數小時（hpi）內，相位(wei)-振(zhen)幅散點圖(tu)的(de)(de)(de)(de)變化（0hpi為感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染前的(de)(de)(de)(de)參考培養物）。在BV感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染從0到99 hpi的(de)(de)(de)(de)整個過程中(zhong)，相位(wei)-振(zhen)幅散點圖(tu)的(de)(de)(de)(de)可明顯分離出(chu)三(san)個細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)類群(qun)，分為是(shi)活細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)（viable）、感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染晚期（LPI）和死細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)（dead）類群(qun)（圖(tu)5）。類似于酵母(mu)（圖(tu)1），在較高的(de)(de)(de)(de)相位(wei)值（150?到220?）下分離出(chu)“活”細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)類群(qun)。這部分活細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)在感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染后(hou)的(de)(de)(de)(de)0-48hpi，阻抗(kang)(kang)振(zhen)幅增(zeng)加了約(yue)60%，這與感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染后(hou)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)“膨脹”狀態相一致。阻抗(kang)(kang)振(zhen)幅的(de)(de)(de)(de)變化提供了感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染水平(ping)的(de)(de)(de)(de)定(ding)量讀數，可用于從病(bing)毒滴定(ding)分析中(zhong)確(que)定(ding)病(bing)毒與細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)比率（感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染多(duo)重性，MOI）。48hpi后(hou)，活細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)阻抗(kang)(kang)振(zhen)幅降(jiang)低(di)（細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)萎縮）且數量逐漸減(jian)少，直至99hpi細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)全部死亡（見圖(tu)6）。感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染晚期（LPI）細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)類群(qun)出(chu)現在較低(di)相位(wei)，這部分細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)在0-60hpi逐漸增(zeng)加隨后(hou)減(jian)少直至消失，這是(shi)由于感(gan)(gan)(gan)(gan)(gan)染后(hou)期的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)裂(lie)解所(suo)致。
圖(tu)S3 未感染桿狀(zhuang)病毒(du)（BV）的(de)Sf9昆蟲(chong)細胞活性的(de)變化(hua)上(shang)圖(tu)為未(wei)感(gan)(gan)染桿狀病毒（BV）的Sf9昆蟲細(xi)(xi)(xi)胞活性的變(bian)化，同感(gan)(gan)染細(xi)(xi)(xi)胞一致，相(xiang)位-振(zhen)幅散點圖(tu)也可分離(li)出活細(xi)(xi)(xi)胞（viable）、感(gan)(gan)染晚期（LPI）和死細(xi)(xi)(xi)胞（dead）類群(qun)。如圖(tu)所示，細(xi)(xi)(xi)胞活力(li)(97.9 %±0.7 %)在79 hpi的連續(xu)生(sheng)長過(guo)程(cheng)中始終保持(chi)不變(bian)。僅(jin)當在99 hpi超過(guo)典型的繼代間隔時間時，細(xi)(xi)(xi)胞活力(li)下降至約93.1%，這可能是由于營養(yang)限制(zhi)或細(xi)(xi)(xi)胞密度過(guo)高(gao)所致。與感(gan)(gan)染的Sf9昆蟲細(xi)(xi)(xi)胞的相(xiang)位-振(zhen)幅散點圖(tu)（圖(tu)5）相(xiang)比，未(wei)感(gan)(gan)染細(xi)(xi)(xi)胞的振(zhen)幅分布(bu)（與細(xi)(xi)(xi)胞大(da)小相(xiang)關）在0-60h內(nei)略有變(bian)窄，而直到60h才明顯(xian)檢測(ce)到LPI（感(gan)(gan)染晚期）細(xi)(xi)(xi)胞類群(qun)，到99h時該類群(qun)略有增加。感染桿狀病毒(du)（BV）后的Sf9昆蟲(chong)細(xi)胞活力和重(zhong)組(zu)蛋白表達的時間動力學變化本文除(chu)利用IFC法(fa)、臺盼藍染(ran)(ran)色(se)鏡檢法(fa)追蹤了感(gan)染(ran)(ran)桿狀病毒(du)（BV）后的(de)(de)Sf9昆蟲(chong)細胞活性的(de)(de)動力學變(bian)化，還同時(shi)利用綠(lv)色(se)熒光蛋(dan)轉(zhuan)染(ran)(ran)Sf9細胞以量化重(zhong)(zhong)組蛋(dan)白的(de)(de)產量，下圖為感(gan)染(ran)(ran)桿狀病毒(du)（BV）后的(de)(de)Sf9昆蟲(chong)細胞活力和重(zhong)(zhong)組蛋(dan)白表(biao)達的(de)(de)時(shi)間動力學變(bian)化。
圖6 感染桿狀病毒（BV）后的(de)Sf9昆(kun)蟲細胞活力和(he)重組蛋白表達(da)的(de)時間動力學變化(hua)結(jie)果表明，在(zai)感染BV后的(de)24hpi內，IFC法與臺(tai)盼(pan)藍成像(xiang)細胞(bao)(bao)(bao)計(ji)數(shu)器(qi)的(de)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)結(jie)果高度(du)一致；24-60hpi內，IFC法檢(jian)(jian)(jian)測(ce)到(dao)的(de)活性(xing)(xing)快速下(xia)降到(dao)50%（紅實(shi)線），而(er)臺(tai)盼(pan)藍成像(xiang)細胞(bao)(bao)(bao)計(ji)數(shu)器(qi)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)到(dao)的(de)細胞(bao)(bao)(bao)活性(xing)(xing)下(xia)降緩慢，僅從(cong)100%下(xia)降到(dao)80%（藍實(shi)線）；從(cong)60hpi后，細胞(bao)(bao)(bao)活性(xing)(xing)均(jun)快速下(xia)降，但到(dao)99hpi時(shi)(shi)，IFC法的(de)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)結(jie)果僅為5%，而(er)臺(tai)盼(pan)藍成像(xiang)細胞(bao)(bao)(bao)計(ji)數(shu)器(qi)的(de)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)結(jie)果為42%；整(zheng)個測(ce)試過程中，兩者差異在(zai)79hpi時(shi)(shi)達(da)到(dao)最大(da)，分別(bie)為11%和(he)78%。79hpi的(de)相位(wei)-振(zhen)幅散點圖（圖5）表明此時(shi)(shi)IFC法可以(yi)準確捕捉到(dao)細胞(bao)(bao)(bao)阻抗信號發生了(le)巨大(da)變(bian)化(hua)（細胞(bao)(bao)(bao)的(de)大(da)規模重(zhong)組），而(er)臺(tai)盼(pan)藍成像(xiang)細胞(bao)(bao)(bao)計(ji)數(shu)器(qi)卻(que)不能及時(shi)(shi)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)到(dao)這一變(bian)化(hua)。感染桿狀(zhuang)病(bing)毒（BV）后的Sf9昆蟲(chong)細胞大(da)小的變化在(zai)BV感(gan)染的(de)(de)(de)(de)不(bu)同階段，細(xi)(xi)胞(bao)大(da)小有顯著(zhu)差異。因此，臺盼藍成像(xiang)細(xi)(xi)胞(bao)計數法(fa)(fa)通常用細(xi)(xi)胞(bao)大(da)小表征(zheng)BV感(gan)染的(de)(de)(de)(de)狀(zhuang)態和重(zhong)組(zu)蛋白(bai)的(de)(de)(de)(de)產量質(zhi)量。如圖7所(suo)示，在(zai)23-60 hpi之(zhi)間(jian)，感(gan)染細(xi)(xi)胞(bao)從最(zui)初的(de)(de)(de)(de)12.8μm膨脹到約16μm，然后在(zai)99 hpi時最(zui)終縮(suo)減到8.5μm（圖7A，紅色虛線(xian)(xian)）。這與IFC法(fa)(fa)獲得的(de)(de)(de)(de)平均振幅(fu)（圖7A，黑色虛線(xian)(xian)）的(de)(de)(de)(de)變(bian)化趨勢非常相似，分析表明，振幅(fu)數據與平均細(xi)(xi)胞(bao)大(da)小有很好(hao)的(de)(de)(de)(de)相關性（R2=0.901）（圖7B）。也(ye)就是說IFC法(fa)(fa)不(bu)僅可以(yi)評(ping)估細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)(de)活力(li)，還(huan)可以(yi)評(ping)估細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)(de)大(da)小。
圖7 感染桿狀病(bing)毒(du)（BV）后的Sf9昆(kun)蟲細胞(bao)大小的變化LPI（感染晚期）類群(qun)大(da)小與重(zhong)組蛋白產量的關系(xi)相較于臺盼藍成像細胞計數法，IFC法可進一步將失活細胞區分為感染晚期（LPI）和死細胞（dead）兩個類群（圖5）。隨感染時間的延長，LPI類群的細胞在48-60 hpi內逐漸增多，到72 hpi幾乎全部消失。這一類群的大小與裂解細胞中檢測到的表達trGFPuv的濃度相關（圖6，紅色虛線和黑色實線）。隨著BV感染的進一步發展，表達的trGFPuv隨細胞裂解釋放到培養基中（圖6，黑色虛線），其濃度的變化與IFC確定的死亡細胞總數的比例完全一致（圖6，紅色虛線）。盡管細胞外表達的trGFPuv的數量最終會超過細胞內的trGFPuv，但培養基中的不必要反應和裂解細胞釋放的蛋白酶可能會降低表達蛋白的質量，因此研究者并不希望將這部分釋放的蛋白質用于后續應用。由于IFC法檢測到的LPI群體與表達的胞內蛋白密切相關，因此利用Ampha Z32（IFC）可以很好地預測胞內蛋白的理想收獲時間。以上研究表明，Ampha Z32（IFC）微流控阻抗流式細胞儀是一種快速、可靠、無標記的細胞活力檢測技術。不僅可以在發酵過程中可靠測定細胞活力，細胞大小的變化，評估培養條件；還可以在昆蟲細胞bv感染過程中篩選理(li)想的表達條件、病毒滴度，預測BV昆蟲細胞系統中獲得胞內蛋白的理想(xiang)時間，可廣泛應用于微生物和動物單細胞的培養中。Opitz C , Schade G , Kaufmann S , et al. . Applied Microbiology and Biotechnology, 2019, 103(20).
